作者：辽宁医学院畜牧兽医学院 王东梅 王维新 刺参具有较高的经济价值和药用价值，现已成为中国北方海产养殖业的主要养殖品种之一。然而近几年刺参细菌性与病毒性疾病年夜范畴产生，造成刺参养殖财产丧失惨重。刺参疾病防御已成为当务之急。今朝，抗生素及化学药品治疗给动物自身、动物产物及情况带来一系列的题目。如：动物病原菌发生抗药性，引起内源性沾染和二重沾染，特殊是持久应用会造成消化道内微生态掉协调情况污染，同时药品在生物中的残留还直接影响人类健康。是以，国度对这类药物的应用已作了严厉的限制。 近年来利用免疫加强剂来进步海产动物机体免疫力的研讨应运而生，有关海参免疫加强剂方面的研讨已有一些报道，如：饲猜中添加甘草酸可以进步刺参的非特异性免疫力和抗病力。现已证实有跨越200 种中草药含有多种免疫活性物资，这些免疫活性物资能调节动物机体的免疫功效，中草药已被普遍地利用于海产养殖中。穿心莲、年夜青叶和金银花等复方中草药可以有用克制或杀灭刺参病原菌，加强刺参非特异性免疫功效；吴亚楠等以黄芪和党参为主药制成的复方中草药可以光鲜明显进步刺参的免疫力和抗病力。实验以黄芪为主药并参加别的4 味中草药制成复方中草药制剂，研讨口服分歧剂量复方中草药对刺参体腔液中酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、一氧化氮合酶（NOS）及超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响，旨在将中草药用于刺参养殖中，为刺参的绿色健康养殖供给保障。 1 资料与方式 1.1 资料 健康刺参购于辽宁锦州金域刺参良种场，体长（4.0±0.35）cm，体质量（3.0±0.45）g。将刺参豢养于12 L 塑料水槽中，水温（17±1）℃，pH（8.1±0.2），海水盐度为29±2，每箱豢养20 头刺参，日投喂1 次稚参饲料（下战书16 ：00）并换水30 %。驯养1 周后用于实验。 复方中草药配方：以黄芪为主药，五味子、当回、野菊花和甘草4 味中草药为辅药。所用中草药购自锦州健康源年夜药房，破坏后过100 目筛。将破坏后的中草药分辨以质量分数为1 %、2 %、3 % 和4 %的比例添加到基本饲猜中。 1.2 实验设计 实验分5 个处置组，分辨为对比组（A 组），投喂基本饲料；1 %（质量百分比）复方中草药组（B组）、2 % 复方中草药组（C 组）、3 % 复方中草药组（D 组）和4 % 复方中草药组（E 组），每组设3个平行，每平行豢养20 头刺参。采取口吃法对其投喂24 d。投喂时代仍天天按时换水并丈量温度、盐度和pH 等各项水质指标，按时察看刺参发展及健康状态。分辨于投喂后第7 天、第10 天、第14 天、第18 天和第24 天测定刺参各类免疫指标。 1.3 样品制备 每次从各组中掏出2 头刺参，分辨从刺参腹部接近***约1 cm 处抽取体腔液，匀浆器研磨后离心（4 000 r/min，4 ℃，10 min），取上清液，4 ℃保留。 1.4 酶活性的测定 ACP、AKP、NOS 和SOD 活性应用试剂盒测定。ACP、AKP 和NOS 活性依照血清中此酶检测方式测定；SOD 活性依照血清中总超氧化物歧化酶活气法测定。NOS 和SOD 测按时取样量为20 μL。 1.5 数据处置 数据用SPSS 13.0 软件进行单素方差剖析（One-way AN0VA），成果以均匀值± 尺度差表现，当P <0.05 时以为差别光鲜明显。 2 成果与剖析 2.1 复方中草药对刺参ACP 活性的影响 复方中草药各实验组在投喂后24 d 内ACP 活性浮现的是先升高后下降。此中第14 天，C 组ACP 活性到达最高值为2.91 U/100 mL，是A 组的2.6 倍。表白2 % 复方中草药实验组后果最佳。经统计剖析，C 组与A 组间差别光鲜明显，其他组间差别不光鲜明显。 2.2 复方中草药对刺参AKP 活性的影响 复方中草药同样能进步刺参体腔液中AKP 活性。在口服后24 d 内AKP 活性随时光延伸而上升，在第24 天时，C 组AKP 活性最高，为3.05 金氏单元/100 mL，是A 组的2.52 倍；经统计剖析，C 组与A 组间差别光鲜明显，其他组间差别不光鲜明显。 2.3 复方中草药对刺参NOS 活性的影响 饲猜中添加复方中草药分歧水平地进步了刺参体腔液NOS 活性。各实验组在投喂后24 d内，NOS 活性浮现的是先升高后下降。口服后第18 天，B 组NOS 活性为10.76 U/mL，是A 组的8.54倍。经统计剖析，B 组与A 组间差别光鲜明显，其他组间差别不光鲜明显。 2.4 复方中草药对刺参SOD 活性的影响 复方中草药各实验组在投喂后24 d 内刺参体腔液中SOD 活性均升高，活性随时光延伸而下降。在口服后第18 天以C 组SOD 活性最高，为137.08 U/mL，是A 组的2.25 倍；C 组与A 组间差别光鲜明显，而其他组差别不光鲜明显。 3 会商 3.1 复方中草药对刺参ACP、AKP、NOS 和SOD 活性的影响 ACP 和AKP 都是溶酶体的主要构成部门，此中ACP 是巨噬细胞溶酶体的标记酶。实验用ACP的活性表现吞噬细胞肃清异物的才能。成果表白：口服分歧剂量复方中草药后24 d 内刺参体腔液ACP 活性均比对比组高，2 % 复方中草药实验组后果最佳；口服后第14 天酶活性到达最年夜值，之后逐渐降落，这可能与免疫疲惫有必定关系，关于其内涵机制还须要进一步的研讨。AKP 生物学意义重年夜，不仅在细胞膜上较为活泼，在体能细胞代谢进程中也具有主要感化。实验中AKP 酶活性随时光的延伸而升高，口服第18 天后上升的速度有所降落，2 % 复方中草药实验组后果最佳。孙永欣在刺参AKP 酶活性实验中打针分歧剂量黄芪多糖，活性是先升高后下降，且0.6 mg/ 头组活性最高。 饲猜中添加1 % 的复方中草药进步了刺参体腔细胞NOS 活性。NOS 催化L- 精氨酸，在体内合成与多种免疫活性有关的内源性NO，从而转变机体的免疫才能，包含经由过程禁止DNA、卵白和脂质合成而具有的抗菌和抗病毒活性。 SOD 活性可作为机体健康状态的反应指标之一，进而成为免疫体系的反应指标。实验中口服分歧剂量复方中草药进步了刺参体腔液中SOD 活性，加强抗氧化才能，这与黄芪成分中的黄酮和皂甙打消氧自由基的感化相干。酶活性先升高后下降的趋向，与樊英等给刺参打针黄芪多糖对免疫影响的研讨一致。黄芪对史氏鲟感化的研讨证实，它对机体的影响有益，SOD 活性升高，脂质过氧化物的天生削减。 3.2 复方中草药对刺参的免疫调节感化 刺参一旦发病，发病急、病程短且病逝世率高，用抗生素治疗后果不睬想，所以预防是重要办法之一。因为刺参特异性免疫体系不完美，是以要进步刺参的免疫力就必需进步刺参的非特异性免疫力。 中草药具有本钱低、药效好且无残留的特色，可作为免疫加强剂添加在刺参饲猜中，对于进步刺参的免疫力和削减疾病的产生有必定感化。孟庆年夜等针对刺参腐皮综合征筛选出由当回、川芎、刺五加、穿心莲、年夜蒜和甘草等8 味中药构成的中草药免疫加强剂，按1 % 添加到基本饲猜中，对刺参有较好的免疫加强感化。吴亚楠等以黄芪和党参为主药加上甘草和当回等5 味中草药，豢养刺参成果表白：1.5 % 添加量可以光鲜明显进步其免疫力和抗病力。多糖是黄芪的重要活性成分之一，别的还含有黄酮、胆碱、氨基酸、蔗糖、微量叶酸及微量元素等物资。郭文婷等以黄芪为主药，配以***羊藿、党参和年夜黄等中草药添加到饲猜中投喂对虾，发明实验组虾酚氧化酶、过氧化氢酶和抗菌活气都光鲜明显高于对比组。刘红柏等研讨证实，黄芪可以或许分歧水平地加强史氏鲟的非特异性免疫力；而黄芪皂苷在抗氧化、抗朽迈、抗肿瘤及加强免疫等方面也有光鲜明显活性。 实验中依照中医学的理论以黄芪为主药，辅以甘草、当回、五味子和野菊花四味药佐之。成果表白：2 % 复方中草药实验组对进步刺参的非特异性免疫力后果最佳，可以在刺参养殖中推广应用。
