淡水渔业研讨中间水产遗传育种研讨室董在杰研讨员的团队从分子调控和外部身分等方面持续对红罗非鱼的体色分化变异的遗传机制进行了研讨。构建了3种分歧体色红罗非鱼(粉白、红斑和黑斑)的microRNA文库，进一步验证了靶基因包含slc7a11, mc1r和asip在红罗非鱼体色分化变异中的主要性，并判定出了2个明显差别表达的体色调控的microRNA miR-138-5p和miR-722;对slc7a11基因进行了全长克隆、表达特征、细胞定位以及RNA干扰的研讨;还从遗传—情况互作方面研讨了温度和饲猜中酪氨酸和胱氨酸对红罗非鱼体色的影响。部门研讨结果已在2018年的《International Journal of Molecular Sciences》、《Aquaculture》、《水产学报》等期刊上颁发。具体进展如下：
1.采取高通量测序构建了3种分歧体色红罗非鱼(粉白、红斑和黑斑)的microRNA文库，获得了总共81,394,491个原始reads和158个明显差别表达的miRNA 。经由过程靶基因猜测和功效剖析，验证了靶基因包含slc7a11, mc1r和asip在红罗非鱼体色分化变异中的潜伏主要性。进一步进行了miRNA-mRNA调控收集联系关系剖析，判定出了2个明显差别表达的 miR-138-5p 和 miR-722在调控体色中主要感化。
2.经由过程RACE PCR技巧获得了红罗非slc7a11基因的全长cDNA序列，其包含3个亚型，全长分辨为2159 bp, 2190 bp和2249 bp，克隆492，525和492个氨基酸。及时荧光定量表白其在红斑体色红罗非鱼的腹部皮肤中表达量最高。免疫荧光定位显示其卵白集中在皮肤细胞的细胞质和细胞核中。为进一步断定基因功效，进行了slc7a11基因双链RNA干扰研讨，今朝断定了最佳的打针部位，打针剂量和打针时光。经由过程尾静脉打针5 μg/g 7天内的干扰后果最好。
3.饲猜中添加分歧程度的酪氨酸(0.5%, 1%, 2%)和胱氨酸(0.1%, 0.5%, 1%)饲喂红罗非鱼(15.04 ± 0.03 g).)68天，察看其对体色调控主要感化的玄色素合成通路的影响。成果显示，饲猜中额外添加酪氨酸和胱氨酸明显影响红罗非鱼皮肤玄色素含量和酪氨酸酶活气，以及酪氨酸酶基因和slc7a11基因的mRNA表达。
